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紫外可見分光光度計是實驗室中十分常見的儀器之一，本文就紫外可見分光光度計在檢定中常見的幾個問題進行解析, 例如：在實驗中誤差的來源進行分析與誤差的解決方法，還有儀器出現(xiàn)相關(guān)問題（如：吸收池的使用方法，儀器的預(yù)熱等） 的解決方法，波長準(zhǔn)確度的檢驗和矯正.

引言

紫外分光光度計，是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜來研宄物質(zhì)的 結(jié)構(gòu)、成分和物質(zhì)間相互作用的有效手段。此光度計可以在 紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。通過每種物質(zhì)*的、 固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上某些特征波長處的 吸光度高低判別或測定該物質(zhì)的含量。而在日常生活和生產(chǎn) 過程中，難免會出現(xiàn)些問題，接下來就常見的一些問題進行 探討。

1.紫外可見分光光度計檢定常見問題的探討

雜散光問題:雜散光的存在使紫外可見光純度會降 低，從而使檢測的誤差增大。雜散光使紫外分光光度計的準(zhǔn) 確性己經(jīng)不正確。雜散光的產(chǎn)生與整臺儀器有著密不可分的 關(guān)系，可能由于光敏部位的密封不嚴(yán)，光學(xué)元件的錯位、損 壞、不潔凈、老化有關(guān)。

解決雜散光的對策：由于該光度計計的光敏元件是十分 靈敏，要想保持元件的溫度正常則必須進行必要的散熱， 然而通過散熱，空氣中的灰塵會從散熱孔中吸入從而在光敏 元件上進行附著，灰塵的附著會使雜散光超差。解決這些灰 塵，使用酒精擦拭可以解決，使用吹風(fēng)機進行吹干防止酒 精的殘留。由于反光鏡的制作具有特殊性，軟膜鍍于表面， 所以只能采用火棉膠進行除塵，這樣才能保持鍍于表面的 軟膜不被破壞。另一個容易引起雜散光超差的原因是紫外可 見光光度計元件的位移。一是由于準(zhǔn)直鏡導(dǎo)致，修復(fù)此故障 需要進行調(diào)節(jié)準(zhǔn)直鏡的螺母，調(diào)節(jié)到誤差消除，直到達到 檢定要求。二是由于聚焦失常，由于聚光鏡和光源燈錯位， 使光斑中出現(xiàn)雜色或者光暈在光斑中出現(xiàn)。這時需要調(diào)整焦 距與光源的位置直至出現(xiàn)一半光斑，純凈且均勻，此時說 明調(diào)整完成，固定好光源位置便可

基線平直度的問題：在紫外可見光光度計中基線 平直度作為主要的技術(shù)參數(shù)，十分重要。由于基線平直度、 漂移和噪聲此三者的綜合作用，讓紫外可見分光光度計性 能突出。當(dāng)基線平直度的超出誤差范圍時，扭曲值和假峰值 便會在光度計圖譜上出現(xiàn)，從而大大降低光度計的準(zhǔn)確性。

解決基線平直度的對策：使基線平直度超差的原因可能 是光的散射，光敏元件被污染等等，通過對光學(xué)軟件的雜質(zhì) 進行清理來進行基線平直度的調(diào)修。如果發(fā)現(xiàn)在光源切換時 基線發(fā)生較大跳動時，需要通過光源的檢查與校正來解決此 問題。當(dāng)儀器使用長時間以后，要及時得到進行保養(yǎng)與維修 來進行基線平直度的消除。同時通過穩(wěn)壓器的安裝來確保電 壓的穩(wěn)定。

2.儀器預(yù)熱問題的討論

關(guān)于儀器的預(yù)熱，一般分光計光度計的說明書上 的要求大約為20分鐘；如果是帶微處理器的分光光度計， 儀器開機后大約有10分鐘的左右時間進行自檢。而就在分 光計的預(yù)熱過程中，會存在這樣那樣的問題，例如：認為儀 器的初始化過程便是加熱過程，開機只預(yù)熱電路系統(tǒng)。

預(yù)熱的目的：通過進行儀器的預(yù)熱，是儀器達到的使用過程，使得數(shù)據(jù)的測量更加穩(wěn)定與準(zhǔn)確。通過儀 器的預(yù)熱，會使光路系統(tǒng)處于穩(wěn)定的狀態(tài)，使電子元件（電 容、電阻）的穩(wěn)定。

預(yù)熱的正確方法：1、對于一般的分光光度計，通 電后，調(diào)節(jié)測定選擇靈敏檔及波長值，在光路上放置一個吸 收池，將吸收池中裝上純水，調(diào)“ 0%T”及“ 100%T” 后，將 吸收池的暗箱蓋蓋上，將儀器預(yù)熱大約20分鐘，當(dāng)儀器所 顯示的讀數(shù)不再變化后便進行測定。2.對于帶有微處理器有 自檢功能的分光光度計，開機儀器進行自檢結(jié)束后，將所需 的波長值在測定窗口上進行設(shè)置，同樣將裝有純水的吸收池 放置與光路上，調(diào)“0000A”后，將儀器進行預(yù)熱，當(dāng)儀器 所顯示的讀數(shù)不再發(fā)生變化后進行測定。

由于紫外可見分光光度計具有雙光源，為了燈的使用壽 命，開機自檢結(jié)束后關(guān)掉不需要使用的光源。

3.分光光度計檢定中的誤差分析

由于檢測方法的不當(dāng)引起的誤差：連續(xù)法經(jīng)常使 用于對于波長示值得檢測，此方法是通過對連續(xù)的驅(qū)動波 長的檢測，利用儀器自身的投射比示值的變化來測試。這種 檢測方法會使測得的光譜產(chǎn)生很大的影響（由于光譜曲線的 影響），這種方法終經(jīng)實踐后被否定。根據(jù)JJG178-2007 的規(guī)定，可以使用逐點法。逐點法是可以保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的 一種方法，該方法可以將儀器的波長大限度的反映出來。 按照該方法規(guī)定的要求進行檢測便可以減少誤差的產(chǎn)生。

由于檢測的環(huán)境的不符合所造成的誤差：當(dāng)進行 物質(zhì)的檢測時，可能受到檢測的環(huán)境的影響，環(huán)境的不符合 會造成誤差。例如：若未對分光光度計進行處理（即密封處 理），或者儀器的密封性不是很好，會讓強光直接照射光源 系統(tǒng)，從而使雜散光減少，使檢測結(jié)果產(chǎn)生誤差。如果環(huán)境 中含有較多的灰塵，會使灰塵沾染到濾光片，從而產(chǎn)生誤差。

4.波長準(zhǔn)確度的檢查與矯正 在平常使用分光光度計時，并不需要進行儀器波長準(zhǔn)確 度的檢查。若在平常測定中發(fā)現(xiàn)靈敏度下降，此時才需要進 行檢查，簡單的檢查方法是當(dāng)儀器開機后，將波長調(diào)節(jié)為 580nm，將一張白紙插入到吸收池座的通光道中，如果有一 長方形的黃色光斑出現(xiàn)在白紙上，這就說明該波長準(zhǔn)確度是 在正常的范圍，如果未出現(xiàn)，則需要進行波長矯正。如果儀 器在長途搬運后，如果更換光源的燈泡或者受到機械振動以 后，則要進行波長準(zhǔn)確度的檢查和矯正。矯正的方法有：利 用氪燈的特征發(fā)射線矯正法，干涉濾光片法等。

5.結(jié)論

綜上，當(dāng)我們使用紫外可見分光光度計的檢定過程中， 一定要遵循說明書的操作過程，以及規(guī)定的相關(guān)的工作規(guī)范， 同時注意保持相關(guān)的環(huán)境，盡量制造少塵的、甚至無塵的環(huán) 境來進行紫外可見分光光度計的校檢，同時，當(dāng)我們在分光 光度計的日常使用和操作過程中，對儀器的日常維護是必不 可少的，若我們長期不使用分光光度計，需要進行除潮的操 作，定時進行開機，如:在半個月的進行通電預(yù)熱15分鐘， 讓分光光度計保持在干燥的狀態(tài)。當(dāng)紫外可見分光光度計的 氪燈使用的時間接近或者超過了 500h的壽命，燈能量降低 到甚至通不過檢查，此時，我們需要換新燈進行解決。我們 在日常使用過程中，同時需要保持溫度的恒定，來營造一個 適合紫外可見分光光度計工作的環(huán)境。